• Мошкевич Ирина Рувимовна
  • 2007
  • 22

Микробные биопленки при смешанных инфекциях автореферат диссертации для написания диплома, курсовой работы, тема для доклада и реферата

Микробные биопленки при смешанных инфекциях - темы дипломов, курсовиков, рефератов и докладов Ознакомиться с текстом работы
Специальность ВАК РФ: 03.00.07 — Микробиология
  • Реферун рекомендует следующие темы дипломов:
  • Эпидемиология и современные представления об этиопатогенезе бронхиальной астмы
  • Определение факторов патогенности микроорганизмов
  • Определение адгезивной активности микроорганизмов
  • Реферун советует написать курсовую работу на тему:
  • Микроэкология задней стенки глотки детей, больных бронхиальной астмой
  • Показатели гуморального иммунитета у женщин со смешанными урогенитальными инфекциями на различных этапах гестации перед проведением терапии
  • Получение внеклеточного матрикса бактериальных сообществ
  • Реферун советует написать реферат на тему:
  • Выявление передачи генов антибиотикоустойчивости
  • Измерение оптической плотности матрикса
  • Определение липидного состава матрикса микробных сообществ
  • Реферун предлагает написать доклад на тему:
  • Выявление признаков хромосомной ДНК во внеклеточном матриксе биопленок
  • Формирование микробных сообществ в присутствии ДНКазы
  • Действие ДНКазы на образование отдельных компонентов бактериальной биопленки
  • Действие на бактерии биопленок антибиотиков, способных проникать в клетки эукариот
  • Совместное действие антибиотиков и ферментов на бактерии при формировании биопленок
Поделиться с друзьями:

Выдержки из автореферата диссертации Мошкевич Ирина Рувимовна, 2007, 03.00.07 — Микробиология

Актуальность. В последнее время наблюдается все более широкое распространение смешанных инфекций Наиболее часто возбудители выделяются в виде устойчивых ассоциаций при интраабдоминальных инфекциях (Меньшиков Д Д, Янискер Г Я, 1990), инфекциях мягких тканей, абсцессах и флегмонах (Georgalas С et al, 2002, Sakae FA et al, 2006), инфицировании ожоговых ран (Федоровская Е А и др, 1984, Алексеев А А и др , 1998) В этиологической структуре пневмонии на долю смешанных инфекций приходится от 2 до 48% случаев заболевания (Kauppmen МТ et al, 1995, Bartlett J G et al, 1998, Вишнякова JIA , Жоголев С Д , Мошкевич И Р , 2001, Lim W S et al, 2001) Для смешанных инфекций по сравнению с заболеваниями, вызванными одним микробом, характерно более тяжелое клиническое течение, которое трудно поддается лечению и часто сопровождается различными осложнениями С одной стороны, это связано с тем, что смешанные инфекции возникают на фоне снижения иммунитета, причиной которого являются длительное применение антибиотиков, тяжелые травмы, хирургические вмешательства и т д С другой стороны, причиной неудач в лечении может быть широкое распространение резистентных штаммов и, что особенно важно, неспособность антибактериальных препаратов проникать в биопленки и оказывать непосредственное воздействие на формирующие их бактерии

За прошедшее десятилетие была доказана роль биопленок в развитии целого ряда инфекций человека По данным Центра по контролю заболеваемости (США) до 65% заболеваний человека может быть связанно с формированием биопленок (Potera С, 1999) Наиболее важной отличительной особенностью бактерий, находящихся в составе сообществ, является повышенная в 50-500 раз резистентность к антибактериальным препаратам (Adam В ,G et al, 2002, Rice S A et al, 2005) Стандартная терапия способна справиться только с отдельно существующими планктонными клетками, в то время как бактерии внутри биопленки способны размножаться и вновь диссеминировать после завершения

курса лечения, приводя к формированию хронических процессов и рецидивов заболевания

Повышение эффективности терапии болезней микробной этиологии является чрезвычайно актуальной задачей Современная стратегия и тактика терапии таких болезней в большинстве случаев предусматривает комплексное лечение больных Вместе с тем, препараты, усиливающие действие антибиотиков на биопленки, образованные при моно- и смешанных инфекциях, практически отсутствуют В большинстве работ, посвященных изучению толерантности биопленок, представлены данные о формировании сообществ одним видом микроорганизмов Остаются недостаточно изученными свойства смешанных биопленок, сформированных неродственными бактериями Данных о действии эндо- и экзогенных ферментов, а также о совместном влиянии ферментов и антимикробных препаратов на биопленки в доступной литературе обнаружить не удалось

Цель исследования - оценить способность микроорганизмов, выделенных при смешанных инфекциях, образовывать общие биопленки и изучить чувствительность бактерий, входящих в состав сообществ, к действию антибиотиков и ферментных препаратов

Задачи исследования

1 Определить роль смешанных инфекций в этиологии гнойно-воспалительных процессов челюстно-лицевой области и неспецифических заболеваний легких

2 Оценить возможность получения смешанных биопленок, образованных бактериями, изолированными из материала больных с микст-инфекциями

3 Оценить действие антибактериальных препаратов на смешанные биопленки, образованные различными видами микроорганизмов in vitro

4 Изучить действие протеолитических ферментов и ДНКазы на биопленки бактерий

5 Оценить характер сочетанного действия антибиотиков и ферментов на смешанные биопленки

Научная новизна

Установлено, что штаммы неродственных бактерий, выделенные из материала больных с одонтогенными абсцессами и флегмонами челюстно-лицевой области и неспецифическими заболеваниями легких смешанной этиологии, способны формировать общие биопленки

Биопленки, образованные несколькими видами бактерий, обладают общими и индивидуальными свойствами по отношению к сообществам, сформированным одним видом микроорганизмов

Бактерии в составе смешанных биопленок более защищены от действия антибактериальных препаратов, чем в сообществах, образованных каждым микроорганизмом в отдельности

ДНКаза угнетает формирование биопленки и потенцирует действие антибиотиков на бактерии в составе смешанных биопленок

Использование ДНКазы совместно с антибиотиками в комплексном лечении больных с абсцессами и флегмонами челюстно-лицевой области ускоряет снижение микробной обсемененности гнойной раны

Практическая ценность работы Разработаны и внедрены в клиническую практику новые эффективные схемы антимикробной терапии у больных с абсцессами и флегмонами челюстно-лицевой локализации, учитывающие свойства смешанных биопленок На основании полученных данных доказана обоснованность сочетанного назначения ферментов и антибиотиков при лечении больных гнойно-воспалительными заболеваниями челюстно-лицевой области

Основные положения диссертации, выносимые на защиту 1 Штаммы бактерий, выделенные от больных с гнойно-воспалительными процессами челюстно-лицевой области и неспецифическими заболеваниями легких смешанной этиологии, формируют in vitro сложные микробные био-

пленки, отличающиеся повышенной устойчивостью к антибактериальным препаратам

2 Ферментные препараты задерживают формирование смешанных микробных биопленок, образованных неродственными аэробными и анаэробными бактериями, и способствуют снижению биомассы сообществ

3 Применение ДНК-азы в сочетании с антибиотиками в комплексном лечении смешанных инфекций у больных с одонтогенными абсцессами и флегмонами челюстно-лицевой локализации позволяет ускорить очищение гнойной раны и, следовательно, сократить общую продолжительность терапии, уменьшить сроки пребывания больных в стационаре и снизить частоту рецидивов заболевания

Внедрение в практику

Результаты диссертационного исследования внедрены в диагностическую работу бактериальной лаборатории и в практическую деятельность клиники челюстно-лицевой хирургии СПбГМУ имени академика И П Павлова, использованы в лекциях и семинарах для студентов и врачей СПбГМУ имени академика И П Павлова

Апробация результатов исследования Основные положения диссертации доложены на X и XI национальных конгрессах по болезням органов дыхания (Санкт-Петербург, 2000, Москва, 2001), на XI и XIII конгрессах Европейского респираторного общества (Берлин, 2001, Вена, 2003), международной конференции челюстно-лицевых хирургов и стоматологов (СПб, 2004) Диссертация апробирована на заседании кафедры микробиологии, вирусологии и иммунологии СПбГМУ имени академика И П Павлова и на проблемной комиссии «Микробиология и иммунология» СПбГМУ им акад И П Павлова (2007)

Личный вклад автора Личное участие автора осуществлялось на всех этапах работы Автор выполнил микробиологические исследования клинического материала пациентов,

включенных в исследование и экспериментальной части работы, провел статистическую обработку и анализ полученных данных

Публикации

По теме диссертации опубликовано 11 научных работ, в том числе 2 статьи в ведущих изданиях, рекомендованных ВАК РФ

Объем и структура диссертации Работа изложена на 127 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, 3 глав, заключения, выводов, практических рекомендаций и списка литературы, включающего работы отечественных и зарубежных авторов Диссертация иллюстрирована 29 рисунками и 28 таблицами Материалы и методы исследования Обследовано 128 больных с флегмонами и абсцессами челюстно-лицевой области, находившихся на лечении в клинике хирургической стоматологии и челюстно-лицевой хирургии Санкт-Петербургского государственного медицинского университета имени академика И П Павлова в 2003-2005 гг Сбор материала (раневое отделяемое) осуществляли стерильными тупферами (Sarstedt, Германия), которые помещали в транспортную среду Эймса и в течение 24 часов доставляли в лабораторию Материалом для исследования у 102 больных с неспецифическими заболеваниями легких, госпитализированных в клиники СПбГМУ имени академика И П Павлова в 1997-2000 гг служила утренняя порция мокроты

Заключение

На основании проведенных исследований установлено, что из материала больных с гнойно-воспалительными заболеваниями различной локализации в более чем 30% случаев высевается смешанная микробная флора, что позволяет судить о распространенности смешанной инфекции в данной патологии При флегмонах в 78% случаев и в 54 % при абсцессах челюстно-лицевой локализации в раневом отделяемом и в 33% из мокроты у больных пульмонологического профиля высевались ассоциации микроорганизмов в диагностических титрах Чаще всего при смешанных инфекциях челюстно-лицевой области в патологическом материале больных встречались зеленящие стрептококки и грамот-рицательные анаэробные палочки, при патологии органов дыхания -S pneumoniae и Н influenzae Исходя из современных представлений о сущест-

вовании бактерий в природе и в организме хозяина в виде микробных сообществ, была оценена возможность штаммов, выделенных от больных формировать биопленки in vitro Установлена возможность получать и изучать in vitro смешанные микробные биопленки, образованные штаммами F nucleatum и Р intermedia, полученными из материала больных с гнойно-воспалительными заболеваниями челюстно-лицевой области, а также Spneumoniae и Н influenzae, изолированными из мокроты больных с патологией легких Изучено действие антибактериальных препаратов, применяемых при лечении соответствующей патологии, на моно- и смешанные сообщества Установлено, что антибиотики имеют схожий характер действия на биопленки, образованные одним или несколькими видами бактерий Показано, что 5-50 МПК различных антибиотиков, независимо от их природы и механизма, практически не оказывают действия на сформированные микробные биопленки Выживаемость бактерий в биопленках в присутствии антибиотиков возрастала по мере формирования сообщества При оценке сочетанного действия на моно- и смешанные биопленки in vitro антибиотиков и ферментных препаратов установлена потенцирующая роль последних, в особенности ДНКазы На основании данных лабораторных исследований ДНКаза была использована в клинической практике в комплексной антибактериальной терапии, что привело к статистически достоверному сокращению сроков очищения гнойной раны, снижению частоты осложнений и рецидивов заболевания у больных с гнойно-воспалительными процессами челюстно-лицевой области Эти данные были подтверждены результатами повторного количественного микробиологического исследования раневого отделяемого больных, выполненных на фоне комплексного лечения, включающего антибактериальную и ферментную терапию

Выводы

1 По данным микробиологического исследования смешанная микробная флора высевалась в 66% проб материала от пациентов с одонтогенными

воспалительными заболеваниями челюстно-лицевой области и в 33 % образцов материала от пульмонологических больных

2 Микроорганизмы, выделенные из материала больных с микст-инфекциями способны in vitro образовывать смешанные микробные сообщества, пригодные для изучения их биологических свойств и оценки действия на них антимикробных препаратов

3 Антибиотики лучше действуют на бактерии в биопленках, образованных одним видом микроорганизма и менее эффективны по отношению к бактериям, находящимся в составе смешанных сообществ

4 Протеолитические ферменты и ДНКаза усиливают действие антибактериальных препаратов на биопленки бактерий, выделенных от больных с микст-инфекциями

5 При включении ДНКазы в схему комплексной терапии улучшение микробиологических показателей в ходе лечения (отсутствие микробного роста или снижение микробной обсемененности патологического материала) отмечено у 76% пациентов с абсцессами и 84% больных с флегмонами, против 33 и 37% в группе контроля соответственно

Практические рекомендации

1 При назначении антибактериальной терапии одонтогенных воспалительных заболеваний челюстно-лицевой области необходимо учитывать высокий процент ассоциаций возможных возбудителей При выборе антибактериального средства необходимо оценивать их активность как в отношении аэробных, так и анаэробных микроорганизмов, а также их способность проникать в биопленки

2 Включение ДНКазы в схему комплексной терапии можно считать целесообразным для оптимизации лечения одонтогенных воспалительных заболеваний челюстно-лицевой области

3 Универсальность действия ДНКазы позволяет рекомендовать этот фермент для лечения инфекционных процессов смешанной этиологии в соче-

тании с любым антибактериальным препаратом, независимо от природы и механизма действия

Список работ, опубликованных по теме диссертации.

1 Мошкевич И Р Чувствительность штаммов Н influenzae, выделенных от пульмонологических больных в С-Петербурге / М Е Фаустова, Ю В Рез-цова, Т С Сологуб, И Р Мошкевич, JI А Вишнякова // 8-й Национальный конгресс по болезням органов дыхания Сборник резюме —Москва, 1998 — С 180

2 Мошкевич И Р Вспышка внебольничной пневмонии неясной этиологии у детей Санкт-Петербурга / М А Никитина, С И Петрова, JIА Вишнякова, И Р Мошкевич, С П Выдумкина, Т Ф У Меркулова // 10-й Национальный конгресс по болезням органов дыхания Сборник резюме - Санкт-Петербург, 2000 -С 215

3 Мошкевич И Р Пневмококковая и хламидийная инфекции в закрытом коллективе / J1 А Вишнякова, С Д Жоголев, И Р Мошкевич // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии -2001 -№4 -С 60-64

4 Мошкевич И Р Этиологические особенности острой внебольничной пневмонии у детей / А В Папаян, JI А Вишнякова, М А Никитина, С И Петрова, И Р Мошкевич, С П Выдумкина, Н Б Румель, Т В Смольянинова // 11—й Национальный конгресс по болезням органов дыхания - Москва, 2001 -С 202

5 Мошкевич И Р Характеристика возбудителей абсцессов и флегмон челю-стно-лицевой локализации / К JI Артеменко, В В Тец, И Р Мошкевич // X Международная конференция челюстно-лицевых хирургов Сборник тезисов и докладов - Санкт-Петербург, 2004 - С 23

6 Мошкевич И Р Комплексная оценка эффективности применения препарата «Цифран CT» при обострении воспаления в пародонте / JIЮ Орехова, О В Прохорова, М В Осипова, И Р Мошкевич // Пародонтология -2006 -№2 (39) - С 61-63

7 Мошкевич И Р Применение фермента дезоксирибонуклеазы у больных с абсцессами и флегмонами челюстно-лицевой области /ММ Соловьев, В В Тец, А П Бобров, К JI Артеменко, И Р Мошкевич, Г В Тец // Стоматология -2006 -Т 85, №6 -С 40-46

8 Moshkevich I Sensitivity of Н influenzae strains isolated from pulmonary patients inhabitans of S-Petersburg / M Faustova, Y Reztsova, T Sologub, I Moshkevich, L Vishniakova // 8th ERS Ann Cong Abst - Geneva, 1998 - P 95

9 Moshkevich I Sensitivity of Streptococcus pneumoniae and Haemophilus influenzae strains isolated from respiratory patients / M Faustova, Y Reztsova, T Sologub, I Moshkevich, L Vishniakova // 9th Eur Cong of Clin Microb and Infect Dis Abst - Berlin, 1999 -P274

10 Moshkevich I R Clinical and etiological features of community-acquired pneumonia (CAP) in pediatric population in St Petersburg /1 R Moshkevich, M A Nikitma, L A Vishniakova, S P Vydumkma, A V Papayan // 11th ERS Ann Cong Abst-Berlin, 2001 -P 291

11 Moshkevich I R Bacterial culture results in patients with interstitial lung diseases / I R Moshkevich, Y V Rezstova, M E Faustova, L N Novikova // 13th ERS Ann Cong Abst - Vienna, 2003 -P 183

ЛР №020365

Поделиться с друзьями: